Приказ Минсельхоза РФ от 03.04.2006 N 105 «Об утверждении ветеринарных правил лабороторной диагностики гриппа А птиц»

Содержание

1. Приказ. Об утверждении ветеринарных правил лабороторной диагностики гриппа А птиц
2. Приложение. Ветеринарные правила лабороторной диагностики гриппа А птиц
1. Статья 1. Область применения
2. Статья 2. Общие положения
3. Статья 3. Обязательные требования по отбору проб для проведения диагностики гриппа птиц
4. Статья 4. Методы и сроки проведения лабораторных исследований

Приказ

Об утверждении ветеринарных правил лабороторной диагностики гриппа А птиц

В целях повышения эффективности борьбы с гриппом птиц и в соответствии с пунктом 5.2.11 Положения о Министерстве сельского хозяйства Российской Федерации, утвержденного Постановлением Правительства Российской Федерации от 24 марта 2006 г. N 164 (Собрание законодательства Российской Федерации, 2006, N 14, ст. 1543), приказываю:

утвердить Ветеринарные правила лабораторной диагностики гриппа A птиц согласно приложению.

Приложение

к Приказу

Минсельхоза России

от 3 апреля 2006 г. N 105

Ветеринарные правила лабороторной диагностики гриппа А птиц

Статья 1

Область применения

1.1. Настоящие Правила устанавливают обязательные требования к организации лабораторной диагностики гриппа A птиц (далее — грипп птиц).

1.2. Положения настоящих правил обязательны для выполнения на территории Российской Федерации органами государственной власти, предприятиями или иными хозяйствующими субъектами, учреждениями, организациями, общественными объединениями, независимо от их подчинения и форм собственности, должностными лицами и гражданами.

Статья 2

Общие положения

2.1. Диагностические лабораторные исследования и серологические тесты по определению напряженности поствакцинального иммунитета (далее — лабораторные тесты) проводят в специализированных ветеринарных учреждениях.

2.2. Лабораторная диагностика гриппа птиц направлена на выявление в исследуемых объектах ветеринарного надзора:

вируса гриппа птиц;

РНК вируса гриппа птиц;

антигенов вируса гриппа птиц;

антител к вирусу гриппа птиц.

2.3. При проведении лабораторных тестов могут быть использованы методы лабораторных исследований, применяющие:

тесты, утвержденные в установленном порядке;

тесты, которые реализуются с использованием тест-систем, зарегистрированных в установленном порядке в Российской Федерации.

Статья 3

Обязательные требования по отбору проб для проведения диагностики гриппа птиц

3.1. Отбор проб крови и патологического материала проводит ветеринарный работник, имеющий специальную подготовку.

3.2. Пробы маркируются и опечатываются. К пробам прилагается сопроводительный документ, содержащий сведения о дате и месте отбора проб, юридическом или физическом лице — владельце птицы и месте его нахождения, виде, возрасте птицы и ее состоянии на момент отбора проб.

3.3. Для проведения исследований осуществляют отбор проб патологического материала (органы, ткани головного мозга, легких, трахеи, селезенки, участков кишечника, почек, сердца) от павшей или убитой с диагностической целью птицы.

3.4. От каждого стада птицы отбирают для исследований 5 — 10 трупов или патологический материал от 5 — 10 трупов, клоакальные и/или трахеальные смывы от 10 — 15 голов, 1 — 10 сборных проб помета от стада.

У мелких видов птиц для отбора проб используют свежий помет.

Пробу помета рекомендуется отбирать из расчета 1 грамм помета на 60 точек птичника (выгула или вольеры), выбранных по диагонали крест-накрест.

3.5. Пробы крови для определения антител к вирусу гриппа птиц рекомендуется отбирать у 25 — 30 птиц из стада (партии), из одного птичника (зала) или одного населенного пункта, местности (водоема).

Пробы крови отбирают из подкрыльцовой вены в пробирки, увлажненные физиологическим раствором. Кровь выдерживают до образования сгустка при комнатной температуре или в термостате при 37 град. C в течение 1 — 2 часов, затем обводят иглой или пастеровской пипеткой, отслаивая сгусток крови от стенок пробирки, и оставляют на 16 — 18 часов при температуре 2 — 4 град. C. Образовавшуюся прозрачную без признаков гемолиза сыворотку отбирают с помощью пипетки в отдельные, чистые пробирки.

Отбор крови допускается проводить с помощью иглы и шприца (или вакуумной пробирки).

Рекомендуется проводить центрифугирование проб крови для получения сыворотки в течение 10 — 15 минут при 1000 об./мин. для осаждения свободных эритроцитов.

Для серодиагностики используют парные пробы сывороток крови, полученные от больных или инфицированных птиц, в начале заболевания и через 4 — 10 дней.

3.6. Пробы транспортируются во влагонепроницаемой таре, в контейнере с хладоэлементами или в термосе со льдом. Допускается однократное замораживание сывороток.

При транспортировке проб соблюдают установленные ветеринарно-санитарные правила и меры безопасности, предъявляемые к транспортировке биологических материалов, содержащих инфекционные агенты 3-й группы патогенности.

3.7. Если немедленное исследование проб невозможно, допускается сохранять образцы на протяжении 4 дней при температуре 4 град. C.

При необходимости для увеличения срока хранения диагностические образцы и/или изолят помещают в морозильную камеру с температурой -80 град. C.

Статья 4

Методы и сроки проведения лабораторных исследований

4.1. Для установления диагноза на грипп птиц допускается применение следующих методов:

а) для выявления вируса гриппа птиц — биопроба на СПФ (свободных от патогенной микрофлоры) — цыплятах с обязательным последующим подтверждением специфичности биологической реакции;

б) для выделения вируса гриппа птиц — метод выделения вируса на СПФ — куриных эмбрионах или в культуре клеток;

в) для обнаружения антигенов вируса гриппа птиц:

1. иммуноферментный анализ (ИФА) для обнаружения одного или нескольких белков вируса;
2. иммунопреципитация (двойная иммунодиффузия по Оухтерлони (далее — РДП) или иммуноэлектроосмофорез (далее — ИЭОФ);
3. иммунохроматографические методы (далее — ИХА);
4. радиоиммунный анализ (далее — РИА);
5. непрямая гем- и латексагглютинация;
6. реакция связывания комплемента (далее — РСК);

г) для обнаружения гемагглютинина (гемагглютинирующей активности) вируса гриппа птиц:

1. реакция гемагглютинации (далее — РГА) с подтверждением специфичности в реакции торможения гемагглютинации (РТГА);
2. ИФА на основе моноспецифических сывороток или моноклональных антител к вирусному гемагглютинину;

д) для обнаружения РНК вируса:

1. полимеразная цепная реакция (далее — ПЦР);
2. ПЦР с последующим секвенированием ее продуктов;
3. Дот-блот и блот гибридизация нуклеиновых кислот;

е) для обнаружения антител к вирусу гриппа птиц:

1. ИФА;
2. РДП и ИЭОФ;
3. ИХА;
4. РИА;
5. РТГА;
6. РСК;

ж) для субтипирования вируса по гемагглютинину и нейраминидазе:

1. РТГА;
2. сиквенс к ДНК или ПЦР-продукта;
3. ПЦР;
4. Дот-блот и блот гибридизация нуклеиновых кислот;
5. ИФА на основе моноспецифических сывороток или моноклональных
   антител к вирусному гемагглютинину;

з) для субтипирования противовирусных антител по гемагглютинину:

1. РТГА;
2. ИФА на основе моноспецифических сывороток или моноклональных антител к вирусному гемагглютинину.

4.2. Применение иных тестов допускается для получения предварительных результатов.

4.3. Методы проведения лабораторных исследований реализуются на основе утверждаемых в установленном порядке методик проведения обязательных диагностических исследований.

4.4. Сроки проведения лабораторных исследований устанавливаются в зависимости от метода исследования и не могут превышать 1 месяца.